USB-IF在2000年4月27日推出了USB 2.0标准，至今已经有25年了。USB 2.0标准的出现正式将USB接口推向主流市场，提供了当时极快的数据传输速度，达到了480Mbps，比USB 1.1标准的12Mbps要快得多，提升了40倍，甚至比苹果引以为傲的FireWire 400还要快。更重要的是，USB 2.0的成本比FireWire 400更低，加上支持热插拔等特点，很快就成为了主板上的常客，直到现在还能看到。
虽然英特尔是制定USB 2.0标准的主要厂商之一，但是第一家使用USB 2.0的主板芯片组厂商是威盛（VIA）。威盛在2002年发布了VT8235南桥芯片，与P4X333和KT333搭配使用。苹果也在2003年开始支持USB 2.0，推出了配备新接口的Mac。英特尔直到2004年才发布支持USB 2.0的主板芯片组，用于支持奔腾4处理器。
早期USB 2.0推广的难题之一是缺乏广泛的驱动程序支持，直到微软在2022年8月发布Windows XP Service Pack 1时，情况才得到改善。如果用户使用Windows 2000，要到2003年的Service Pack 4时才等来支持。尽管Windows 98第二版在世纪初的几年里依然流行，但是一直没有USB 2.0的原生支持，需要第三方的驱动程序。
USB 2.0的出现取代了以往连接到计算机的并行和串行接口，体积更小巧更紧凑也更快，而且旧端口也不支持热插拔，USB优势明显，对计算机具有划时代的意义。USB-IF还提供了较小的USB连接器类型，包括Mini USB和Micro USB，使得像智能手机和平板电脑等便携设备在使用上更加方便。
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